1、適用范圍和原理

本實(shí)驗(yàn)方法是將植入物插入試驗(yàn)動物肌肉內(nèi)，對試驗(yàn)樣品植入物與對照樣品植入物的生物學(xué)反應(yīng)進(jìn)行比較，用于評估肌肉組織對植入材料的生物學(xué)反應(yīng)。對照材料是已確立臨床可接受性和生物相容性的醫(yī)療器械所采用的醫(yī)療器械所采用的材料。

2、試驗(yàn)依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)

國內(nèi)：GB/T 16886.6 醫(yī)療器械生物學(xué)評價 第6部分：植入后局部反應(yīng)試驗(yàn)；

國外：ISO 10993-6 Biological evaluation of medical devices—Part 6: Tests for local effects after implantation。

3、樣品制備

試驗(yàn)和對照樣品的常規(guī)制備按3.1的規(guī)定，植入物尺寸根據(jù)選用的肌肉群的大小來確定。采用家兔脊柱旁肌試驗(yàn)時，采用寬1~3mm、長大約10mm的植入物。樣品應(yīng)制成圓形邊緣，兩端為光滑球面?；蛘呖墒中g(shù)植入直徑10mm、厚度3mm的較大樣品。樣品應(yīng)制成圓形邊緣，兩端鈍角修圓。

4、對照樣品的選擇

對照樣品可以為上市對照，也可以依據(jù)GB/T 16886.12 附錄A 選擇陰性對照材料，如PE, 硅樹脂、氧化鋁、不銹鋼。

5、實(shí)驗(yàn)動物和植入部位

將植入物植入家兔或其他動物的肌肉組織時，植入部位的大小應(yīng)滿足植入物的要求。每次試驗(yàn)只能使用一種動物，兔脊柱旁肌為首選植入部位，較小的樣品也可選用大鼠臀肌或家兔股肌。

6、實(shí)驗(yàn)動物使用數(shù)量

每一植入期至少采用3只動物，在充足的植入部位植入10個試驗(yàn)樣品和10個對照樣品。用于評價的試驗(yàn)和對照樣品本應(yīng)至少來自3只不同的動物。

如需要對照材料產(chǎn)生的反應(yīng)大于最小反應(yīng)時，可在試驗(yàn)材料的對側(cè)部位植入另外的已知能引起最小組織反應(yīng)的對照材料。

7、植入步驟

采用家兔脊柱旁肌時，將4個或3個試驗(yàn)材料樣品植入每只家兔脊柱一側(cè)肌內(nèi)，應(yīng)平行于脊柱，離中線25~50mm,各植入物間隔約25mm，同法在脊柱另一側(cè)植入4個或3個對照材料樣品。

8、植入周期

應(yīng)根據(jù)臨床可能接觸時間，或是持續(xù)至相應(yīng)生物學(xué)反應(yīng)達(dá)到或超過某一穩(wěn)定狀態(tài)的時間，來確定試驗(yàn)周期，所選擇的時間點(diǎn)應(yīng)進(jìn)行說明和論證。確保生物學(xué)組織反應(yīng)達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)。短期一般選擇1周和4周。長期一般選擇13周和26周。 表1為標(biāo)準(zhǔn)推薦的長期植入觀察期選擇。

表1. 皮下組織、肌肉、骨長期植入試驗(yàn)觀察期選擇

9、取樣和病理切片制作

到試驗(yàn)終點(diǎn)時，安樂處死動物后，解剖取樣。制作病理切片，HE染色。

10 、生物學(xué)反應(yīng)評價

通過記錄不同時間點(diǎn)觀察到的肉眼和組織病理學(xué)反應(yīng)來評價生物學(xué)反應(yīng)。將試驗(yàn)樣品、對照樣品或假手術(shù)部位的反應(yīng)進(jìn)行比較。依據(jù)GB/T 16886.6 附錄E進(jìn)行植入后局部生物學(xué)反應(yīng)評分。與上市對照或者音信對照比較，依據(jù)下表判定器械的組織反應(yīng)。

表6. 組織病理學(xué)結(jié)果判定